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对大多数细胞来而言，每1μgdna使用3.0μlpeimax转染试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgdna使用1.5~4μl体积线性peimax转染试剂进行优化。peimax(mw40,000)为polysciences公司生产的化合物产品，每批产品出厂前都经过严格的检测,保证每批产品都100%合格、稳定且品质高,但由于作为转染试剂使用过程中有很多实验室因素(配置方法，ph,水纯度,称量的准度,dnarna纯度,细胞状态，细胞品系…)造成溶解出现问题或者转染效率出现差异,所以厂家只受理该产品纯度，分子量及重量缺失破损等相关投诉，针对极个别客户溶解问题和转染效率问题我们能友善解决。pei转染试剂对复合物孵化的时间是有要求的，一般建议5~20分钟之间。重庆血清兼容pei转染试剂

注意事项质粒质量：请务必使用高质量转染级无内质粒（推荐使用qiagen或者mn公司去内质粒提取试剂盒）。通过260nm光吸收测定dna浓度，260nm/280nm比值确定dna纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用gibco或者78bio公司血清培养细胞。更多关于pei转染试剂相关产品问题，欢迎咨询上海曼博生物！广东pei转染试剂怎么样用pei转染试剂时，一般和dna的比例是多少呢？

方法：1．细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％co2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2ml预热的无血清培养基。2.制备pei-dna混合物：以60mm组织培养皿用420μl反应总体积为例。准备两支1.5ml离心管，一管将质粒dna（总量2-8μg为佳）加入240μlhbs中，混匀。另一管中则用hbs将100μm的pei储存液稀释成10μm，充分混合。然后取180μl10μmpei溶液加入含有dna的hbs中，充分混匀后室温静置20-30min。将这420μl的pei-dna混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀，置于含5％～7％co2的37℃温箱孵育。注：每次用100μm的pei储存液前都需要先将其充分混匀，保证所取的浓度一致。3.培养6-10h后更换为37℃预热的含有血清的培养基，继续培养，16h左右可以观测到报告基因的表达。更多关于pei转染试剂相关产品问题，欢迎咨询上海曼博生物！

接种细胞：转染前，用胶原酶（worthingtong公司ls004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备dna-pei复合物：dna、pei试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用opti-memitm（invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量dna。用同样的培养基稀释pei试剂。每1μgdna需用1.5-5μl线性pei转染试剂(这个需要客户自行摸索配比，每一批转染试剂和每一批dna比例可能会稍有不同）。一边轻轻涡旋装有dna溶液的试管，一边将稀释的线性pei转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成dna-pei复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如nest5ml/14ml离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入dna-pei复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴dna-pei复合物。转染1.5h后，添加½体积的包含30%血清的生长培养基。更多关于polysciences pei转染试剂，欢迎咨询上海曼博生物！有谁用过40k的pei转染试剂？

材料：质粒dna指数生长的真核细胞pei（聚乙烯亚胺）1×hbs（ph7.4）配方：pei储存液（100μm）：称取125mgpei粉末溶解于50ml1×hbs（ph7.4）中，0.2μm滤膜过滤，储存于4℃备用。1×hbs（ph7.4）：将8.76gnacl溶解于900ml超纯水，加入20ml1m的hepes，调ph值到7.4，定容至1l，过滤（0.2μm滤膜）后储存于4℃备用。方法：1．细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％co2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2ml预热的无血清培养基。如何辨别假的pei转染试剂。无动物源成分pei转染试剂中国代理权

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瞬时转染方法1.接种细胞：转染前一晚，用胶原酶（worthingtong公司ls004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备dna-pei复合物：dna、pei试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。，用opti-memitm（invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量dna。用同样的培养基稀释pei试剂。每1μgdna需用1.5-5μl线性pei转染试剂。一边轻轻涡旋装有dna溶液的试管，一边将稀释的线性pei转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成dna-pei复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如nest5ml/14ml离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入dna-pei复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴dna-pei复合物。转染1.5h后，添加½体积的包含30%血清的生长培养基。4.孵育细胞和分析结果：在co2培养箱中37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后5h即可检测到转入基因的表达。上海曼博生物是polysciences官方授权du jia代理商，更多关于转染试剂相关问题，欢迎咨询上海曼博生物！重庆血清兼容pei转染试剂

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